化工职称论文发表范文 公丁香和母丁香化学成分的高速逆流色谱分析  2012-01-11 13:34:45|  分类： 默认分类 |  标签：高速逆流色谱  公丁香  母丁香  高效液相色   |字号大
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化工职称论文 化工职称论文发表范文 公丁香和母丁香化学成分的高速逆流色谱分析

【转载】公丁香和母丁香化学成分的高速逆流色谱分析高璐 
【摘要】：桃金娘科(Myrtaceae)蒲桃属(Syzygium)植物丁香(Eugenia caryophylla Thunb.)是《中国药典》2005年版收录的中草药,其中公丁香是植物丁香药用未开放的干燥花蕾,母丁香是植物丁香的成熟果实,丁香油具有良好的抗菌消炎作用。公丁香和母丁香的主要活性成分是植物丁香不同生长时期的次生代谢产物,为阐明公丁香和母丁香药理作用差异的物质基础,本文利用高速逆流色谱法分析比较公丁香和母丁香非挥发油成分的同时,并利用高速逆流色谱和高效液相色谱技术对母丁香的化学成分进行了系统研究。 本论文由三部分组成,主要包括以下几方面的研究内容: 首先,综述了公丁香和母丁香化学成分、药理作用、分离提取方法的研究进展以及高速逆流色谱的应用现状与发展趋势。 其次,将公丁香和母丁香95%乙醇回流提取液经逐级萃取、大孔吸附树脂进一步净化,得到公丁香和母丁香的粗提物。利用高速逆流色谱法分离公丁香与母丁香粗提物,并对其主要化学成分进行比较分析。采用溶剂体系正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:8:6:13,v/v/v/v)和(5:8:9:10,v/v/v/v)分布洗脱,公丁香和母丁香以主机转速880 r/min,流速1.2 mL/min,单次进样量70 mg各分离得到9个洗脱组分,两张高速逆流色谱分离图谱的重叠率为66.67%,其中包含6个共有峰,并且各共有峰HSCCC保留时间的相对标准偏差RSD的平均值为2.260%,与国家标准关于方法学考察资料技术参数对RSD≤3%的要求相符合,可以判定公丁香和母丁香化学成分内在质量即存在稳定性和均一性,也具有差异性,说明高速逆流色谱法比较公丁香和母丁香化学成分的可行性,为构建公丁香和母丁香高速逆流色谱指纹图谱奠定基础。同时本实验以上述条件成功地从公丁香和母丁香粗提物中分离得到槲皮素、鞣花酸、5,7-二甲氧基-2-甲基色原酮、5,7-二甲氧基-2,6-二甲基色原酮、3,5,3’4’-四羟基-7-甲氧基黄酮五种非挥发油成分,通过标准品对照以及1~H-NMR、(13)~C-NMR、MS等波谱方法对各化合物的结构进行鉴定。其中化合物5,7-二甲氧基-2,6-二甲基色原酮的结构是首次通过核磁数据进行表征。 最后,在第二部分实验的基础上,利用高效液相色谱技术分离纯化母丁香强极性和弱极性粗提物,得到没食子酸、5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮、母丁香酚三种高纯度化合物,通过标准品对照以及1~H-NMR、(13)~C-NMR、MS等波谱方法对各化合物的结构进行鉴定。其中化合物5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮在母丁香中尚未发现。
【关键词】：高速逆流色谱 公丁香 母丁香 高效液相色谱 5 7-二甲氧基-2 6-二甲基色原酮
【学位授予单位】：辽宁师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：O657.7;R284
【目录】： 中文摘要4-5Abstract5-10第一章 文献综述10-271.1 公丁香和母丁香简介10-161.1.1 两种不同科属植物丁香来源辨析11-121.1.2 公丁香和母丁香的生药材鉴定12-131.1.2.1 公丁香的药材性状121.1.2.2 公丁香的显微鉴定12-131.1.2.3 母丁香的药材性状131.1.2.4 母丁香的显微鉴定131.1.3 公丁香和母丁香的化学成分13-151.1.3.1 目前已知的公丁香的化学成分13-141.1.3.2 目前已知的母丁香的化学成分141.1.3.3 公丁香和母丁香主要化学成分的比较14-151.1.4 公丁香和母丁香的药理作用15-161.1.4.1 公丁香的主要药理作用15-161.1.4.2 公丁香和母丁香主要药理作用的比较161.2 公丁香和母丁香化学成分的提取及分离纯化方法16-191.2.1 公丁香和母丁香挥发油成分的提取方法16-171.2.1.1 水蒸气蒸馏法和超临界CO_2 萃取法161.2.1.2 超声辅助提取技术16-171.2.1.3 膜分离技术171.2.2 公丁香和母丁香挥发油成分的分离方法171.2.2.1 气相色谱法（GC）171.2.2.2 高速逆流色谱法（HSCCC）171.2.3 公丁香和母丁香非挥发油成分的提取方法17-181.2.3.1 浸渍法17-181.2.3.2 回流提取法181.2.3.3 超声提取法181.2.3.4 煎煮法181.2.4 公丁香和母丁香非挥发油成分的分离纯化方法18-191.2.4.1 硅胶柱层析法181.2.4.2 高效液相色谱法18-191.3 高速逆流色谱简介19-261.3.1 高速逆流色谱仪的设计原理19-201.3.2 高速逆流色谱的工作原理201.3.3 高速逆流色谱的分离原理201.3.4 高速逆流色谱技术在现代研究中的应用20-241.3.4.1 高速逆流色谱与高效液相色谱（HPLC）的比较20-211.3.4.2 高速逆流色谱在天然产物活性成分分离中的应用21-231.3.4.3 高速逆流色谱在中药指纹图谱研究中的应用23-241.3.5 高速逆流色谱的发展趋势24-261.3.5.1 高速逆流色谱的微型化与多种分析技术的联用24-251.3.5.2 高速逆流色谱在药物工业化制备方面的应用和发展251.3.5.3 高速逆流色谱在生物药物高效分离中的应用和发展251.3.5.4 制约高速逆流色谱在药物研发中广泛应用的关键问题25-261.4 本研究的目的及意义26-27第二章 公丁香和母丁香化学成分的高速逆流色谱分析27-432.1 实验仪器、试剂与材料27-282.1.1 仪器272.1.2 试剂27-282.1.3 中药材282.1.4 基本实验器材282.2 实验方法28-292.2.1 公丁香和母丁香粗提物的制备282.2.2 高效液相色谱分析条件28-292.2.3 质谱分析条件292.2.4 分配系数的测定292.2.5 高速逆流色谱两相溶剂体系的配制292.2.6 高速逆流色谱分离过程292.3 实验结果及分析29-402.3.1 公丁香和母丁香粗提物的HPLC 分析29-302.3.2 公丁香和母丁香乙酸乙酯萃取相的HPLC 分析30-312.3.3 公丁香和母丁香大孔吸附树脂洗脱结果312.3.4 高速逆流色谱分离公丁香与母丁香粗提物31-322.3.5 公丁香和母丁香高速逆流色谱图中色谱峰的对应性32-352.3.6 高速逆流色谱定量分析公丁香和母丁香的化学成分35-362.3.7 高速逆流色谱图中内参考峰6 的标定36-372.3.8 公丁香和母丁香主要化学成分的纯化37-402.4 讨论40-412.4.1 高速逆流色谱两相溶剂体系的选择40-412.4.2 高速逆流色谱分离图谱中各色谱峰收集方式的选择412.4.3 高速逆流色谱法比较公丁香和母丁香非挥发油成分的可行性412.5 结论41-43第三章 母丁香化学成分的分离纯化43-493.1 实验仪器、试剂与材料433.2 实验方法43-443.2.1 母丁香强极性和弱极性粗提物的制备433.2.2 高效液相色谱分析条件43-443.2.3 高效液相色谱制备条件443.2.4 质谱分析条件443.3 实验结果及分析44-473.3.1 利用制备型HPLC 分离纯化母丁香的强极性粗提物44-453.3.2 利用制备型HPLC 分离纯化母丁香的弱极性粗提物453.3.3 化合物Ⅵ与标准品的对照45-463.3.4 HPLC 的分析结果46-473.3.5 结构鉴定473.4 讨论47-483.4.1 大孔树脂洗脱梯度的改变47-483.5 结论48-49第四章 全文总结和展望49-504.1 全文总结494.2 展望49-50主要创新点50-51参考文献51-54附图54-60致谢60-61个人简历61